别名: G-418硫酸盐;抗菌素G-418;抗生素G-418
外观: 白色粉末。
溶解性: 可溶于水、甲醇、缓冲液和培养基。溶解后,0.22μm过滤除菌,分成小包装,4℃可保存12个月,-20℃保存时间更长。最常用的储存液使用100mMHEPES(pH7.3)配制,浓度为50mg/ml。使用HEPES配制的好处是: 加入储存液不会改变培养体系的pH值。
说明: 真核表达筛选用抗生素,可以用于筛选表达特定抗性基因的稳定细胞株。筛选哺乳动物细胞,推荐起始筛选浓度为400微克/毫升;筛选植物细胞,推荐起始筛选浓度为10微克/毫升;筛选酵母,推荐起始浓度为500微克/毫升。根据起始浓度的效果可以再适当升高或降低G-418的使用浓度。
描述: G418是一种氨基糖苷类抗生素 ,这种氨基糖类抗生素的结构和新霉素、庆大霉素、卡那霉素相似,在分子遗传试验中,是稳定转染最常用的抗性筛选试剂。它通过抑制转座子Tn601,Tn5的基因,干扰核糖体功能而阻断蛋白质合成,对原核和真核等细胞产生毒素 ,包括细菌、酵母、植物和哺乳动物细胞 ,也包括原生动物和蠕虫。当neo基因被整合进真核细胞DNA后 ,则能启动neo基因编码的序列转录为mRNA ,从而获得抗性产物氨基糖苷磷酸转移酶的高效表达 ,使细胞获得抗性而能在含有 G418的选择性培养基中生长
用途: 靠干扰核糖体功能阻断多肽合成。不是常用的标准抗生素,常用于选择新霉素抗药基因转染的原核和真核细胞。在基因转移、基因敲除、抗性筛选以及转基因动物等方面得以广泛应用
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